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測連翹酯苷a含量的方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時間: 2024-06-20 | 190 次瀏覽 | 分享到:

據(jù)《本草綱目》記載,連翹具有清熱解毒、消腫散結(jié)的功效。連翹分為“青翹”和“老翹”。果實初熟,表面尚帶綠色時采收,稱“青翹”;果實熟透時采收,稱“老翹”。連翹酯苷a在連翹的體內(nèi)隨著時間的推薦,其含量卻在發(fā)生著變化。



檢測連翹酯苷a含量的方法有高效液相色譜(hplc)法、液質(zhì)聯(lián)用(lc-ms)法等,連翹酯苷A在330nm處有紫外吸收,使用高效液相色譜法測定,外標(biāo)法定量。



試劑和材料:水、甲醇、乙腈、冰醋酸、連翹酯苷a對照品,連翹藥材等。儀器設(shè)備:高效液相色譜儀,分析天平,離心機(jī),錐形瓶,容量瓶,振蕩器等。


取連翹酯苷a對照品10mg,放在10ml棕色容量瓶中,加入甲醇溶解并定容到刻度,搖勻,得到濃度為1mg/mL的對照品溶液備用。如梯度稀釋,可以用甲醇進(jìn)行定容。


樣品制備:精確稱量0.5g的連翹粉末,放在具塞錐形瓶中,加入70%甲醇15mL,超聲處理30min,放冷后搖勻,再定容過濾。


色譜條件:以C18為色譜柱,以乙腈-冰醋酸為流動相,以0.6mL/min為流速,以10ul為進(jìn)樣量,設(shè)置柱溫35℃,檢測器用紫外可見的,波長設(shè)置330nm。


檢測及數(shù)據(jù)分析:對檢測得到的色譜面積進(jìn)行分析,計算樣品中連翹酯苷a的含量。


液質(zhì)聯(lián)用技術(shù),是在液相色譜分離提取的基礎(chǔ)上,以高靈敏度的質(zhì)譜檢測器進(jìn)行測定。它是以分子量為基礎(chǔ),并對特定化合物進(jìn)行定性和定量分析。


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