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維生素b2，又稱為核黃素，是B族維生素的一種。化學(xué)式為C17H20N4O6，分子量376.37，微溶于水，可溶于氯化鈉溶液，稀的氫氧化鈉溶液，在強(qiáng)酸溶液中穩(wěn)定。光照和紫外照射，可對(duì)它產(chǎn)生不可逆的分解。廣泛存在于酵母、肝、腎、蛋、奶、大豆等中，它不會(huì)蓄積在體內(nèi)，需要經(jīng)常的從食物中獲取。

在生物體內(nèi)，維生素b2主要參與多種生化反應(yīng)。比如，生物氧化和能量代謝，參與維生素b6和煙酸的代謝，并具備抗氧化活性。食物中的維生素b2是以黃素單核苷酸（FMN）和黃素腺嘌呤二核苷酸（FAD）輔酶形式和蛋白質(zhì)結(jié)合存在，當(dāng)它進(jìn)入人的胃中的時(shí)候，在胃酸的作用下和蛋白質(zhì)分離，轉(zhuǎn)變成游離的維生素b2，在小腸部位被吸收。它的主要功能是促進(jìn)代謝，促進(jìn)細(xì)胞的再生，讓皮膚，指甲，毛發(fā)能夠正常生長，預(yù)防口腔和皮膚的炎性疾病，增進(jìn)視力，降低眼睛疲勞等。

實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)方法，一般包括高效液相色譜（HPLC）和比色法。都可以用，根據(jù)實(shí)際情況來選擇檢測(cè)。這里以HPLC為例，簡單的介紹一下檢測(cè)流程和注意問題。

1.樣品處理

在處理樣品之前，要了解樣品的物理和化學(xué)性質(zhì)，根據(jù)維生素b2的特點(diǎn)來確定方法。根據(jù)文獻(xiàn)方法或成熟的處理步驟進(jìn)行，比如稱取5g樣品，在250ml的錐形瓶中，加入鹽酸溶液10mL，搖勻。這個(gè)鹽酸溶液是需要提前準(zhǔn)備好的，通過121℃高溫加熱30min，冷卻至室溫。用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到4.5，使得蛋白質(zhì)沉淀，轉(zhuǎn)移到適量的棕色容量瓶中，定容，搖勻，過濾。濾液再經(jīng)過0.45um濾膜過濾，待測(cè)或避光保存。

2.色譜條件

確定色譜檢測(cè)方法，其實(shí)是對(duì)維生素b2的基礎(chǔ)的物理和化學(xué)性質(zhì)的考查。舉個(gè)例子，采用C18的色譜柱，150mm×4.6mm，5μm；柱溫30℃，以甲醇和0.05mol/L的乙酸鈉溶液（35:65）為流動(dòng)相，流速1.0ml/min。進(jìn)樣量10-20uL，紫外檢測(cè)器，波長440nm，根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行驗(yàn)證和調(diào)整。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線

使用標(biāo)準(zhǔn)品溶解，進(jìn)行適當(dāng)?shù)摹⑻荻认♂?個(gè)濃度點(diǎn)。最低點(diǎn)要在檢測(cè)器的有效檢測(cè)范圍，一般選擇是機(jī)器信噪比的5-10倍。根據(jù)比較適合的色譜條件，依次上機(jī)測(cè)定它們的色譜峰。對(duì)色譜峰面積進(jìn)行手工或自動(dòng)積分，對(duì)應(yīng)各個(gè)點(diǎn)的濃度值，在表格中使用函數(shù)公式，繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線，得的回歸方程，相關(guān)系數(shù)r2一般情況下要大于0.999。有的時(shí)候，為了需求，需要對(duì)方法的重復(fù)性，精密度，回收率等進(jìn)行確認(rèn)。

4.樣品測(cè)定

怎么確定樣品出來的峰就是目標(biāo)化合物的峰呢，通過對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè)，程序是相同的，那么保留時(shí)間也應(yīng)該是一樣的。通過對(duì)樣品的色譜峰面積進(jìn)行積分，結(jié)合回歸方程，是可以計(jì)算出樣品中的維生素b2的含量的。