中文字幕在线观看第一页-日本伦理午夜福利-亚洲欧美人成视频-秘密影院久久综合亚洲综合-亚洲欧美日韩综合精品视频-亚洲成人av电影在线-国产综合日韩伦理

在人體必需氨基酸中，有一個特殊的氨基酸，就是色氨酸，又稱為β-吲哚基丙氨酸。它是植物體內(nèi)生長素生物合成重要的前體物質(zhì)，結(jié)構(gòu)和IAA相似，在高等植物中普遍存在。色氨酸首先脫氨氧化形成吲哚丙酮，再脫羧形成吲哚乙醛；在催化氧化成吲哚乙酸，這就是生長素了。它是有機物，在水中不怎么溶解，在乙醇中也不太好溶，氯仿更不用說了。但是，它能在甲酸中溶解。色氨酸在人體內(nèi)有可大的作用了，它改善了人體的睡眠質(zhì)量，調(diào)節(jié)了不愉快的情緒。研究色氨酸，對于生物、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域，還是有重要的價值和意義的。

檢測色氨酸，就要找到它的特征，才能從樣品中發(fā)現(xiàn)它的含量。就目前來說，檢測它的方法有分光光度法、高效液相色譜法、毛細管電泳法、熒光法等。

1.分光光度法

色氨酸并不是在樣品中獨立存在的，將樣品進行水解。樣品中的蛋白質(zhì)會降解為多肽和游離氨基酸，在酸性介質(zhì)中，氧化劑的作用下，色氨酸吲哚環(huán)和對二氨基苯甲醛發(fā)生反應(yīng)，生成藍色的化合物，在一定范圍內(nèi)顏色深淺和色氨酸的含量是呈線性正比關(guān)系的。通過對梯度稀釋標準品在分光光度計最佳波長處測定吸光度值，以濃度為橫坐標，以吸光度值為縱坐標，繪制出標準曲線，或計算出回歸方程。對樣品進行處理并上機檢測，結(jié)合標準曲線和樣品的吸光度值，可以計算出色氨酸的含量。

2.高效液相色譜（HPLC）法

檢測色氨酸，色譜條件是比較關(guān)鍵的。如果有現(xiàn)成的方法，也要進行測試一下，看是否滿足需求。參考比如，使用C18的色譜柱，以甲醇+0.1%磷酸溶液為流動相，在系統(tǒng)中設(shè)置1ml/min的流速，柱溫是不能忽略的，通?？梢栽O(shè)置35℃，檢測波長280nm。

標準曲線的制作：標準曲線就是一把尺子，精密的吸取色氨酸標準溶液（需要提前按要求配制）1.0，5.0，10.0ml，分別置于100ml的容量瓶中，用水定容到100mL，搖勻。分別取10ul標準溶液進樣檢測，以測定色氨酸的峰面積，對色氨酸濃度繪制標準曲線。

樣品的測定：取樣品溶液10uL，進樣到HPLC中測定，根據(jù)色譜峰保留時間，外標法定量檢測。

結(jié)果計算：根據(jù)樣品的色譜峰面積，由標準曲線回歸方程中得到樣品中色氨酸的含量。