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丹皮酚是從毛茛科植物牡丹干燥的根皮中提取出來的一種有機(jī)化合物，根據(jù)藥理藥效研究證明，丹皮酚具有鎮(zhèn)痛、抗炎、解熱、降壓等作用。在實(shí)驗(yàn)的過程中，準(zhǔn)確檢測(cè)丹皮酚的含量，對(duì)數(shù)據(jù)分析具有重要的意義。獲得檢測(cè)數(shù)據(jù)是科研的基礎(chǔ)，是檢測(cè)過程的結(jié)束，也是科研工作的開始。檢測(cè)樣品中的丹皮酚含量，常用的方法是高效液相色譜（HPLC）法，這里簡單的介紹一下，希望有所參考和幫助，如果有遺漏和不足之處，希望可以相互學(xué)習(xí)。

HPLC測(cè)植物中的丹皮酚含量，主要包括試劑和設(shè)備、樣品制備、HPLC調(diào)試和檢測(cè)，標(biāo)準(zhǔn)曲線制作、計(jì)算結(jié)果和分析等過程。熟悉HPLC的操作的技術(shù)對(duì)色譜條件是非常重視的，C18的色譜柱可以分離出樣品中丹皮酚，以甲醇和水為流動(dòng)相，選擇紫外檢測(cè)器并設(shè)置最佳波長，比如274nm。柱溫35℃，并確定最佳的進(jìn)樣量和流速。根據(jù)設(shè)備和材料，如果跟標(biāo)準(zhǔn)的方法有不同，就可能需要重新進(jìn)行驗(yàn)證。

標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：做液相檢測(cè)含量，基本上都需要做標(biāo)曲的。精確稱量丹皮酚的標(biāo)準(zhǔn)品，如果稱量的過程少了或多了，標(biāo)曲就會(huì)發(fā)生變化，因此操作的過程對(duì)實(shí)驗(yàn)基本功還是有要求的。用蒸餾水對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行梯度稀釋，能夠有6個(gè)不同的標(biāo)準(zhǔn)濃度，目的是能在檢測(cè)器上獲得對(duì)應(yīng)的色譜峰。峰值和濃度是呈對(duì)應(yīng)關(guān)系的，以峰面積積分值對(duì)濃度進(jìn)行回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

對(duì)樣品進(jìn)行處理，這一步看起來是準(zhǔn)備工作，其實(shí)是很重要的。很多時(shí)候，我們發(fā)現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果有偏差，卻又找不到原因，可能需要從最基礎(chǔ)的樣品處理關(guān)注起來。樣品處理真的是“差之毫厘，謬以千里”，如果處理不到位而造成濃度偏低，如果稱量多了可能會(huì)偏大。當(dāng)然，檢測(cè)過程中的方法，對(duì)圖譜的分析，數(shù)據(jù)計(jì)算也是很關(guān)鍵的。對(duì)樣品的處理，有標(biāo)準(zhǔn)的操作要求，在和標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)相同的條件下上機(jī)測(cè)定，通過外標(biāo)法計(jì)算出丹皮酚的含量。